工控維修

PCR儀概述

PCR儀（Polymerase Chain Reaction Instrument）是一種利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)，對特定DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的精密儀器。PCR技術(shù)因其高度敏感、高效和高特異性，被廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)診斷、遺傳學(xué)研究和犯罪學(xué)等領(lǐng)域。PCR儀通過精確控制溫度循環(huán)，實現(xiàn)DNA的雙鏈分離、引物結(jié)合及新鏈合成，從而快速擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。

原理

PCR技術(shù)的基本原理依賴于DNA雙鏈在高溫下變性成單鏈，低溫下引物與單鏈模板特異性結(jié)合，并在適中的溫度下由DNA聚合酶催化合成新鏈。這一過程通過變性、退火和延伸三個步驟的循環(huán)進(jìn)行，理論上經(jīng)過N次循環(huán)，特定DNA片段可擴(kuò)增至2^N倍。PCR儀作為溫控設(shè)備，能夠精確控制每個循環(huán)中的溫度和時間，確保PCR反應(yīng)的順利進(jìn)行。

使用方法

1. 實驗準(zhǔn)備：準(zhǔn)備所需的試劑和儀器，包括模板DNA、引物、dNTPs、緩沖液和酶等，確保所有試劑精確配制并符合實驗要求。

2. 樣品處理：對模板DNA進(jìn)行純化，去除可能的抑制物，并根據(jù)實驗需求調(diào)整濃度。

3. 反應(yīng)體系配制：按照實驗手冊或設(shè)計方案，精確配制PCR反應(yīng)體系，確保每種試劑的用量準(zhǔn)確。

4. 設(shè)置程序：在PCR儀上設(shè)置反應(yīng)程序，包括變性、退火和延伸的溫度及時間，以及循環(huán)次數(shù)。

5. 放入樣品：將配制好的反應(yīng)體系加入PCR管中，放入PCR儀的相應(yīng)位置。

6. 啟動反應(yīng)：啟動PCR儀，按照設(shè)定的程序進(jìn)行反應(yīng)。

7. 結(jié)果分析：反應(yīng)結(jié)束后，通過電泳等方法分析擴(kuò)增產(chǎn)物，判斷實驗結(jié)果。

   
   

常見故障及維修方法

1. 溫度不穩(wěn)定

• 現(xiàn)象：顯示溫度與實際設(shè)定不符或無法達(dá)到設(shè)定溫度。

• 原因：加熱/冷卻系統(tǒng)故障，如加熱元件、風(fēng)扇或傳感器損壞。

• 維修方法：檢查并更換損壞的部件，清潔加熱蓋，保持周圍環(huán)境通風(fēng)。

2. 反應(yīng)混合物沉積

• 現(xiàn)象：PCR管內(nèi)反應(yīng)混合物沉積在管壁上。

• 原因：反應(yīng)液混合不均勻或離心不徹底。

• 解決方法：確保充分混合反應(yīng)液，并在每次使用前輕輕離心管子。

 

3. 漏液

• 現(xiàn)象：PCR管子漏液。

• 原因：封口不嚴(yán)或使用過期的密封膜。

• 解決方法：更換新的密封膜，確保正確封口，避免移動或震動PCR板。

4. 電源問題

• 現(xiàn)象：儀器無法啟動或突然斷電。

• 原因：電源插頭未插緊或電源線路故障。

• 解決方法：檢查電源插頭和線路，必要時更換電源插座或?qū)で髮I(yè)維修幫助。

5. 程序失敗

• 現(xiàn)象：程序運(yùn)行失敗，無法完成預(yù)定循環(huán)。

• 原因：計算機(jī)軟件設(shè)置錯誤、試劑盒質(zhì)量問題或操作步驟不正確。

• 解決方法：檢查程序設(shè)置，更換新的試劑盒，并按照操作手冊正確操作。

6. 燈泡故障

• 現(xiàn)象：紫外燈泡損壞，無法可視化DNA條帶。

• 解決方法：及時更換損壞的燈泡，確保準(zhǔn)確讀取結(jié)果。

維護(hù)保養(yǎng)

1. 定期清潔：使用無絨布塊蘸取75%酒精清潔儀器表面和樣品臺，保持通風(fēng)口暢通無阻。

2. 溫度校準(zhǔn)：定期檢查PCR儀的溫度準(zhǔn)確性，使用溫度驗證試劑盒進(jìn)行檢測，必要時由專業(yè)人員重新校準(zhǔn)。

3. 熱蓋檢查：定期檢查熱蓋是否損壞或密封不良，及時更換或調(diào)整以確保試劑不蒸發(fā)。

4. 樣品槽清潔：定期清洗樣品槽，去除可能的污染物，確保實驗結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

5. 電源管理：在不使用PCR儀時，建議拔下電源插頭，避免長時間待機(jī)對儀器造成損害。

6. 記錄管理：及時填寫設(shè)備使用記錄，記錄每次實驗的條件和結(jié)果，以便追溯和分析。

  通過以上措施，可以有效延長PCR儀的使用壽命，提高實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。同時，遇到復(fù)雜故障時，建議及時聯(lián)系容濟(jì)機(jī)電的技術(shù)支持或?qū)I(yè)維修人員進(jìn)行處理。

容濟(jì)機(jī)電維修過的PCR儀品牌和型號

   1、Thermo Fisher Scientific

（1）Applied Biosystems系列:

   A、Veriti 96-Well Thermal Cycler

   B、SimpliAmp Thermal Cycler

   C、ProFlex PCR System

   D、QuantStudio 3 Real-Time PCR System

   E、QuantStudio 5 Real-Time PCR System

   F、QuantStudio 6 Flex Real-Time PCR System

   G、QuantStudio 7 Flex Real-Time PCR System

   H、QuantStudio 12K Flex Real-Time PCR System

   2、Bio-Rad

（1）T100系列：T100 Thermal Cycler

（2）S1000系列：S1000 Thermal Cycler

（3）C1000 Touch系列：C1000 Touch Thermal Cycler

（4）CFX系列：CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System，

                         CFX384 Touch Real-Time PCR Detection System，

                         CFX Opus 96 Real-Time PCR System，

                         CFX Opus 384 Real-Time PCR System，

   3、 Eppendorf

（1）Mastercycler系列：Mastercycler Nexus，Mastercycler X50，Mastercycler                                             Pro，Mastercycler Gradient

   4、 Roche

（1）LightCycler系列：LightCycler 96 System，LightCycler 480 System II，

                                     LightCycler Nano，LightCycler 1536 Real-Time PCR                                                 System

   5、Agilent Technologies

（1）SureCycler 8800: 高性能PCR儀

（2）AriaMx Real-Time PCR System: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

   6、Qiagen

（1）Rotor-Gene Q: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

（2）QIAquant 96 5plex: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

   7、Analytik Jena

（1）Biometra TAdvanced: 高性能PCR儀

（2）Biometra TRobot: 自動化PCR系統(tǒng)

（3）qTOWER3: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

   8、Takara Bio

（1）Thermal Cycler Dice Touch: 高性能PCR儀

（2）Thermal Cycler Dice Real Time System III: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

   9、Bioer Technology

（1）GeneMax系列：GeneMax

（2）LineGene系列：LineGene 9600 Plus，LineGene K Plus

（3）XP Cycler: 高性能PCR儀

   10、Techne (Bibby Scientific)

（1）TC-3000系列：TC-3000 Thermal Cycler，

（2）TC-5000系列：TC-5000 Thermal Cycler

（3）Prime系列：Prime Thermal Cycler，PrimeG Gradient Thermal Cycler

   11、Abbott

（1）m2000系列：m2000 RealTime System

   12、Cepheid

（1）SmartCycler II: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

（2）GeneXpert系列：GeneXpert Infinity，GeneXpert IV，GeneXpert XVI

   13、 Fluidigm

（1）Biomark HD: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

（2）Juno System: 高通量PCR系統(tǒng)

   14、Illumina

（1）Eco Real-Time PCR System: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

   15、Bioneer

（1）Exicycler 96: 實時熒光定量PCR系統(tǒng)

（2）MyCycler: 高性能PCR儀

   16、盛賽爾（Sansure Biotech）

（1）MA-6000系列：MA-6000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

（2）MA-688系列：MA-688 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

（3）MA-7000系列：MA-7000 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

（4）SLAN系列：SLAN-96P Real-Time PCR System，SLAN-48P Real-Time PCR                                  System

（5）San-Q系列：San-Q5 Real-Time Quantitative Thermal Cycler，

                             San-Q3 Real-Time Quantitative Thermal Cycler

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